厌氧和微嗜氧-创造改良气氛的系统

要点
- 不同的微生物可以在各种气体条件下生长
- 最佳生长条件是快速筛选和鉴定的关键条件
在自然界中,氢(H2)、氧气(O2)、氮(N2)和二氧化碳(CO2),代表了当地环境条件的巨大多样性,支持同样多样化的微生物种群。氧气并非一直是地球大气的组成部分,事实上,在原核生物的进化过程中,氧气并不存在。微生物占据着这些不断变化的生态位,被迫适应生存,这对分类学家来说是一个同样艰巨的挑战。因此,对这种变异的描述应用相对松散的分类是有帮助的,并将工作定义概括为厌氧(氧毒性)或好氧(氧耐受性)。在这两种条件下都能生存的生物被称为兼性或微需氧生物。也有一些重要的生物是CO2依赖或capnophilic。有毒氧(氧自由基和过氧化物)是正常代谢活动的结果,严格的厌氧菌不表达解毒酶系统,保护好氧生物。能够在厌氧或微氧条件下生存的微生物可以作为引起传染病和食物腐败的重要因素。培育这样的生物体需要在适合实验室的规模上创造和维持适当的条件,包括气体环境。下面描述实现这一目标的各种机制。
技术和应用
在实验室中产生一个确定的大气环境需要一个封闭的空间,其中所需的气体组合可以产生和可靠地维护。这一挑战的解决方案从柔性袋到刚性罐,再到完整的孵化器和工作站。
小袋和罐子的设计,以容纳相对少量的板(1-15),并提供实验室的灵活性,以处理少量的厌氧测试要求的样品。袋子和罐子,一旦充满,放置在标准的孵化器。对于大量的要求和实验室通常处理厌氧菌,那么更大的工作站提供了处理几百个板的范围。
在小袋和罐子中所需要的气压通常是由包含产生气体的小袋产生的。这些小袋可以创造厌氧(0% O2)、微氧(高达6% O2)和富CO2的条件。这种技术的原始版本含有硼氢化钠、碳酸氢钠和酒石酸。需要水和低温催化剂来驱动反应,并产生氢气。后来的版本通常含有抗坏血酸的活性成分,它与空气中的氧气发生放热反应,以创造所需的环境。不需要水,也不会产生氢气。
气瓶也可以从钢瓶通过简单和便携式气体混合发电机,将取代标准大气与固定组合的气体或用户定义的组合。该技术避免了产生气体的小袋在达到目标气体浓度时产生的时间延迟。
厌氧和微氧工作站/室为实验室提供了在选定的环境条件下操作和培养样品的设施。气体按用户规定的组合混合,并在整个潜伏期和随后的规程(例如基因组研究)中保持。
袋和罐子是独立的,简单的,一次性的系统,允许少量的样品处理,为小型实验室执行常规厌氧分析提供灵活性。
在研发项目需要更多灵活性的地方,从气瓶中快速填充气体罐,并可重复创建目标环境。
总结
厌氧和微氧工作站提供了更大的吞吐量,并为实验室提供了用户定义的环境,允许全面的样品操作。这意味着整个项目可以在选定的气氛中进行。样品处理、孵育、后续研究和后续程序,通常是基因鉴定,可以在没有环境变化的情况下进行。
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