要点

• 高压灭菌器或杀菌器是使用加压蒸汽来消灭微生物的容器。
• 它们在微生物实验室的作用是准备培养基、试剂和设备
• 或用于净化有害生物废料。

杀菌可以使用多种技术:辐照[紫外线和其他];过滤;化学等。在微生物实验室中，最广泛使用的灭菌器是高压灭菌器——这些灭菌器通过使用加压蒸汽来产生热应力来消灭微生物。为了达到足够的杀灭率，必须提高温度，使最耐高温的细菌也失去活性，因此经典的121°C灭活15分钟。

随着满足各种实验室安全和质量标准的要求的增加，现代高压灭菌器已经从大的“压力锅”广泛使用的日子中得到了相当大的发展，这导致了整个范围的高压灭菌器替代品，选择一个将取决于您的财务以及高压釜将被使用的主要目的。

有必要证实，不仅微生物已被根除，而且培养基的生长特性没有因灭菌周期而受到损害，特别是在培养基方面。事实上，可以保证某些部件在高压灭菌过程中是耐热的，并遭受一定程度的热降解，可能导致性能降低。因此，在灭菌培养基时主要有两个考虑因素:

-热循环是否足以消灭微生物培养基还可用吗？

这两个函数经常会发生冲突。然而，商业上可用的培养基通常带有推荐的灭菌程序，如果遵循这些程序，将允许最佳灭菌，并确保培养基的性能不受影响。加速冷却系统意味着在高温下的时间保持在最低限度，为了方便起见，一些热压罐将对电镀介质具有加热功能，可以将琼脂保持在40°C，以便在需要时浇注。

废物处理的要求较低，因为可以采用一种明确的“过度杀灭”政策，即温度/时间/压力，使任何生物都不能在热循环中存活。但是负载必须有足够的蒸汽渗透，这在有大量空气时很难实现，如有培养皿或多孔负载。

购买注意事项?

重要的是要考虑将要放入高压灭菌器中的物质，以确保您购买的灭菌器具有正确的规格，以有效地处理它，特别是如果您以后必须向认证机构证明这一点。

最关键的因素是载荷。在高压釜中放置太多的材料不允许有足够的空间进行彻底的蒸汽循环-你怎么能确定所有的负载都已充分消毒?确保你的系统采购将应付你需要通过的材料的数量和类型。

预循环真空去除负载中的空气，自由蒸汽提供更好的温度分布，脉冲自由蒸汽改善蒸汽渗透。对于多孔负载，可以使用真空干燥。真空冷却使整个循环时间更快，因此可以在工作日处理更多负载。

高压灭菌器的尺寸范围可以从占地面积小的小型台式模型，因此占用很少的实验室空间，到大型的——几乎是工业规模的系统——通常位于自己的专用设施。

高压灭菌器的经典设计采用圆形截面。这使得高压可以用最小的应力承载材料来实现，但缺点是必须更加小心如何加载高压釜，特别是前置加载系统。最高的容器必须放在架子的中央。

一些制造商通过使用方形或矩形压力容器克服了这个问题。这种设计的热压罐可以更容易地适应各种负载，但需要一个相当坚固的结构来承受内部压力。

随着对实验室过程可证明验证的需求的增加，现在可以使用高压灭菌器，它可以半自动化或完全自动化整个灭菌循环，同时充分记录每个循环的特征。微处理器控制系统可能很难使用，因此考虑谁可能使用该设备以及需要更改设置的频率是很重要的。有些系统很简单，而有些则需要手册和密码才能对设定的时间或温度进行哪怕很小的调整。

并不是世界上所有的实验室都能利用最新的高压灭菌器技术，因此仍有空间安装入门级高压灭菌器——这些当然是最便宜的，但需要大量的劳动力投入。

妥协是不可避免的。更精确的系统将花费更多的钱。

你有多少空间?

地板空间的缺乏表明台式热压罐更合适-然而，这些将不能承受像独立式热压罐那样大的负荷。

然后当然有一个选择前加载或顶部加载高压釜?后者不会占用太多的空间，但它可能是一个问题，提升或搬出大烧瓶的热介质。相反地，前置热压罐需要更多一点的空间——门必须向外打开。

说到门，有带按钮闭门的高压灭菌器——忘了上下蝶形螺母的日子吧。

在某些情况下，有对直通式热压罐的要求-这些能够使负载从热压罐的一侧进入，从另一侧取出-对那些需要不同级别密封的环境有用，如洁净室或类别3。对于培养基准备，有允许多循环运行模式的系统-对培养基有用，如巧克力琼脂?

您是否曾经需要完全自动化媒体准备/板浇筑过程?-如果这是可能的，那么可能是合适的，购买一个高压釜，可以集成在一个平板倒瓶/灌装系统以后的日期。

高压灭菌器应该很容易从内部和外部清洁，一些范围的涂层几乎可以被称为“自清洁”-这些合并的材料具有生物杀灭活性。

高压灭菌器的校准和性能确认测试

为了成功验证一个高压釜，必须确定它的功能符合制造商的预期。这只能通过确保正确校准和服务来实现。

校准是在设定给定温度时，确定高压灭菌器内部实际温度的过程。没有校准-即使有它的不确定性，高压釜内的实际温度是未知的。电子设备可能有问题，温度探头可能损坏，非常有用的备用压力表也可能有问题，等等。

性能鉴定是测试高压灭菌器及其负载的几个通用术语之一，以确保负载得到正确处理。通常使用校准的多通道数据记录器，以便记录负载中的大量点以及高压釜上的突出点。对这些结果的分析可能会指出高压灭菌器设置或装载方式中的许多问题。例如，在玻璃瓶和塑料瓶或塑料和金属废弃容器之间，或者在单袋和双袋废弃货物之间，可以看到显著差异。性能鉴定是了解负载实际情况的唯一方法。测试负载必须是实际处理负载的典型负载，因为结果不一定能被读取。然而，一旦完成性能鉴定，之后仅进行校准通常就足够了-至少在负载不变的情况下。

除了记录时间和温度的数据外，还有一些使用生物和化学指标的技术，以确保实际负荷得到充分消毒:例如彩色胶带、条状、孢子条状和孢子悬浮液。

无论使用何种技术，其在荷载量和荷载含量方面都必须适用于高压灭菌器的典型荷载。

*“实际”指“最佳估计”

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