诊断微生物测试供应商通常会进行检测食品基质中特定病原体的实验，也称为方法验证。该方法与传统的培养细菌学方法在准确性、灵敏度、选择性、检出限和稳健性等方面进行了比较，以确保结果在预期使用范围内。这个过程的目的是演示新方法执行的功能相当于或优于参考方法。这为用户提供了信心，选择使用的方法满足或超过他们的食品安全需求。但是，如果你要测试的食物类型没有经过验证，或者方法设计不当，那该怎么办呢?你该如何进行呢?

Hygiena有一个专门的内部应用团队，由Julie Weller管理，专注于为特定产品和条件生成适合使用的数据。此外，BAX还获得了众多认证^®根据认证机构要求的广泛研究设计，该团队已经验证了超过240种病原体基质组合(表1)。这种无与伦比的专业知识使Hygiena能够在高风险或研究较少的基质中为客户提供特别的支持。

表格1

当在评估未知矩阵时，应在验证阶段之前进行初步测试，以增加成功的概率。这可以包括在不同污染水平的食物基质中对靶病原体的适当生长条件（富集）的基质评估和测定。

验证不是“单尺寸适合 - 所有”，成功取决于对食物基质和靶病原体的理解。基质在物理和化学上有很大差异，这呈现出众多对病原体的挑战。大多数食物都很复杂，由许多不同的成分组成。它们可含有抗微生物化合物，多酚，脂肪和油，大蛋白质;所有这些都可能对恢复和检测产生不利影响。如果对病原体存在矩阵效应，它可以对测试方法检测其的能力产生负面影响。评估这一点的最佳方法是在每次反应中使用内部阳性控制（IPC），即使在没有目标的情况下也可以验证测试的成功。这一重要特征可以减轻假底片，并确保如果存在，测试将准确地检测到病原体。

病原体污染通常是低水平的，有时接近每个测试部分一个细胞，并经常受伤或压力，使恢复困难。从统计学上讲，如果不进行富集步骤，检测到1个细胞的几率太低，无法准确地进行测试。富集的主要目的是将健康的目标细菌数量增加到可检测的水平，同时尽量减少争夺相同营养物质的自然非目标菌群的数量。这是通过将基质与液体营养培养基结合，并在特定的温度和时间培养样品来实现的，最适合支持病原体的生长。例如,沙门氏菌和李斯特菌在35-37°C之间生长最好，但它们的生长速度或翻倍率有很大的不同。一些健康的沙门氏菌每20分钟可以加倍一次L.单核细胞增生需要45-60分钟。这些差异要求样品培养不同的时间段，10小时和24-48小时。一旦优化，就可以建立最终的浓缩方案。

下一步是评估几个污染水平以确定需要多少目标病原体来定义验证协议。接种水平通常是低（根据矩阵的0.2-2 CFU /测试部分），其中目的地证明了该方法的检测限。这允许以可接受的确定性检测到要检测到的病原体的最低浓度。

如上所述，需要建立在成功的验证过程中的许多因素。势在必行工业和监管中使用的微生物测试方法满足其预期用途的最高分析性能标准。bax.^®PCR系统已在严格的验证条件下进行测试，以生成由专用应用团队支持的广泛验证库。在结果方面支持数十年的经验，确保了国家的食品供应安全。