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先进的微生物P ...

2019年6月10日作者:朱莉阿切尔,Campden Bri

快速确认和识别弯曲杆菌在食物中


弯曲杆菌对食品行业的主要原因是细菌食物中毒的主要原因。弯曲杆菌由于它们的敏感性和脆弱性,物种可能是非常有趣的细菌。这种生物是不寻常的,尽管它是毒力,但它很容易通过烹饪,消毒和暴露于空气中存在的氧气的浓度而杀死。还众所周知,物种不会在寒冷温度下生长(但可以存活)。

在食品实验室内的分析期间,必须以极大的关注和注意力来治疗微生物,以防止其死亡。尽管这种敏感性,弯曲杆菌仍然是英国细菌食物中毒的主要原因。报告的案件数目稳定在1981年12月128日的英格兰和威尔士升至2012年的高峰期为65,044;最新出版的数据于2017年(PHE)达到56,729人。

最常与人类疾病相关的物种是Campylobacter Jejuni.Campylobacter Coli.;不太可能的罪魁祸首包括Campylobacter Lari.Campylobacter Upsaliensis.Campylobacter Conciscus.。可以根据它们在不同温度下生长的能力来定义弯曲杆菌。C. JejuniC. Coli.C. Lari.具有42-43°C的最佳生长温度,并且不会低于30°C,因此被称为“热敏”Campylobacters.'。尽管其增长温度较高,但它们并不是特别耐热,通过70℃的巴氏阳化过程充分减少2分钟或等同物。

C. Jejuni导致90%以上C. Coli.不到10%的感染于英国。弯曲杆菌物种具有相对低的感染剂量为50-500个细胞,但一旦感染,它们会导致胃肠病症称为振动杆菌。孵化期为24-72h,该疾病的特征是严重的腹泻,腹部痉挛,发烧和头痛。然而,感染通常是自我限制的,持续约5-7天。很少,可能发生并发症,包括菌血症和一种叫做Guillain-Barré综合征的自身免疫性疾病。

由于弯曲杆菌作为如此重要的食物病原体,它近年来近年来距离食品标准机构(FSA)和行业表示很多关注。最近的FSA战略包括解决问题的优先权弯曲杆菌在鸡。据报道,由FSA开展的一项调查,最初是在2007 - 2008年。弯曲杆菌在销售点测试的65%的新鲜鸡肉样品中存在。调查结果强调了弯曲杆菌我们食品生产中的相关挑战。

调查结果开始了弯曲杆菌风险管理计划包括一系列政府和行业伙伴关系LED项目。例如,家禽行业引入了减少干预措施弯曲杆菌鸡的发病率以及放置持续的自愿监测计划。该计划分类级别弯曲杆菌污染到三个乐队:

  • 每克少于100个菌落形成单位(CFU / g)
  • 100-1000 CFU / g,和
  • 大于1,000 cfu / g

目的是减少具有较高污染水平的乐队中鸡的比例。2015年,FSA意识到较高频段内污染的鸡减少。

弯曲杆菌测试

在Campden Bri,我们参加弯曲杆菌代表零售商在监测工业和FSA监测工作中的监测中的测试。我们使用FSA谐波方法来执行此操作,该方法紧密地对ISO枚举方法。

实现有效监测弯曲杆菌在英国鸡群中的水平,需要一种有效的方法。这种方法必须隔离弯曲杆菌细胞,但防止潜在的假阴性结果或人工减少水平。由于这种微生物的敏感性,重要的是,一种方法可以克服细胞的潜在损伤。这种损伤可能是由食物加工,高培养温度或不利的大气浓度引起的。至关重要的是,实验室可以减轻可以干扰准确检测和枚举的条件弯曲杆菌

传统的检测方法,枚举和识别方法

大多数技术弯曲杆菌隔离遵循传统方法,以ISO标准用于检测和枚举。检测的ISO方法弯曲杆菌10272-1:2017根据测试的食物有几种变化:

  • 检测程序a - 一种选择性富集(博尔顿肉汤),以允许在潜在伤害的数量下复制细胞Campylobacters.,以及较低水平的背景微氟氯。煮熟的产品。
  • 检测程序B - 一种选择性富集肉汤(普雷斯顿肉汤),以抑制背景微生物。这是用于潜在受伤的数量较低的样本弯曲杆菌和高水平的背景植物群。生肉和家禽。
  • 检测程序C - 用于直接电镀到具有高量可行量的样品中的琼脂上弯曲杆菌例如粪便和盲肠样本。

将富集的肉汤转移到改性木炭头孢哌辛酮脱氧胆酸盐(MCCD)琼脂上,以允许选择性生长和分化弯曲杆菌来自微生物内的其他微生物。检测后,ISO 10272-2:2017概述了枚举方法弯曲杆菌在MCCD琼脂上使用菌落数技术在鸡肉中。这将最终确定的数量弯曲杆菌CFU每克找到。

ISO检测和枚举方法分别在2-4和2天内给出推定结果。然而,确认的结果需要额外的形态,生化和生长试验,并进一步持续3天。为了具有殖民地,需要额外的生化测试。

显然,传统方法弯曲杆菌检测可能是耗时和劳动密集的。为了克服这一点,存在一些替代方法。例如,使用抗体的免疫试验可用于捕获靶抗原弯曲杆菌已经开发出全自动酶联免疫吸附剂测定(ELISA)测试以减少劳动力。

然而,它是基于分子的检测方法,这基本上加速了检测和鉴定结果的时间。其中一些方法基于聚合酶链反应(PCR)并通过检测特异性的DNA来操作弯曲杆菌物种。

快速方法

最近有一种更新的确认和识别方法弯曲杆菌这在其廉价速度水平中是无与伦比的。它被称为矩阵辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)系统,它是CAMPDON BRI的验证方法。MALDI-TOF仪器根据其独特的蛋白质概况识别微生物。通过将激光引导到制备的菌落样品上,使MALDI-TOF用于已干燥到金属板上的。这产生了在系统内检测的各种特定蛋白质群体的轮廓,并作为质谱图被可视化。可以将质谱图与数据库进行比较并提供隔离识别。

Maldi-Tof可以快速确认推定弯曲杆菌与典型为期三天的协议相比,在2小时内,与典型的为期三天的协议相比显着减少。此外,结果也识别了弯曲杆菌获得的物种,而ISO方法需要进一步测试以获得这些数据。

Campden Bri在隔离,枚举,确认和识别中经验丰富弯曲杆菌来自食物,提供准确和快速的结果结果。了解更多:

Julie Archer,Microbiology Analytical Services Manager,Campden Bri

朱莉阿切尔在过去的12年里曾在Campden Bri工作过,目前在微生物学部门内管理微生物分析服务(MAS)部分。MAS集团采用各种食品的测试,使用UKAS和非UKAS分类方法,用于致病和腐败的微生物,保质期试验,热处理食品的耐药性和腐败分析,以及使用生化的分离物的鉴定和表征和molecular methods i.e. sequencing and Ribotyping and Mass Spectroscopy.


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日期已发布:2019年6月10日

源文章链接:看法


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